使用 VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法

XENO-FREE 生物功能 VitroGel 水凝胶系统适用于许多 3D 细胞培养和应用。选择“即用型"水凝胶系统以优化配方和简化操作流程，或选择高浓度水凝胶系统，通过“混合搭配"和调整水凝胶来创建定制的微环境。有多种方法可以使用我们的水凝胶系统来满足许多研究需求。为了展示我们水凝胶的灵活性，我们列出了五种流行的可以使用我们的水凝胶进行的细胞培养方法：3D 细胞培养、2D 水凝胶涂层、静态悬浮培养、水凝胶细胞珠和作为可注射载体。这五种培养方法适用于我们所有的即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。用这些方法培养的细胞可以很容易地用用于下游分析或传代培养的VitroGel® 细胞回收溶液。

3D 细胞培养

VitroGel 系统是 3D 细胞培养的理想选择。只需在室温下将 VitroGel 溶液与细胞悬液混合，转移到培养板并添加顶部培养基，细胞就可以进行孵育了。这种 3D 培养方法进行了完整的细胞封装，从而增强了细胞-水凝胶基质的相互作用。许多下游分析，如药物筛选、免疫荧光分析和细胞毒性测定，可以直接在水凝胶中进行。

二维水凝胶涂层

2D 水凝胶涂层方法是在传统 2D 培养和 3D 细胞封装培养之间架起桥梁。通过在室温下将 VitroGel 溶液与细胞培养基混合并转移到培养板中，VitroGel 可以在培养板底部涂上一层厚厚的水凝胶。细胞可以直接添加到水凝胶的顶部。二维水凝胶涂层方法允许细胞与功能性水凝胶物质相互作用/浸入功能性水凝胶物质中，并保持表面暴露于顶部介质。当细胞在水凝胶表面迁移/聚集时，可能会快速形成细胞球体。2D 水凝胶涂层方法可用作与 3D 细胞培养方法相结合的替代共培养方法：将一种细胞类型封装在水凝胶中用于 3D 培养，然后在水凝胶顶部添加另一种类型的细胞作为 2D 涂层培养。二维涂层 VitroGel 也可以成为研究细胞侵袭、血管生成测定和逐层共培养的强大系统。除了 2D 厚凝胶涂层外，VitroGel 还可以稀释用于薄凝胶涂层方法。

静态悬浮文化

3D 静态悬浮培养方案是 VitroGel 水凝胶系统的培养方法。通过简单地将 VitroGel 溶液和细胞混合形成软水凝胶，研究人员可以进一步直接将水凝胶-细胞混合物与额外的培养基混合，制成水凝胶-细胞悬浮液。水凝胶基质分散在细胞培养基中可以增加整个混合物的粘度，帮助细胞在没有强烈搅拌的情况下保持悬浮状态。3D 静态悬浮培养易于制备，可灵活调整各种细胞类型和接种密度的最终粘度，只需改变水凝胶和细胞培养基的混合比例即可。例如，研究人员可以使用固定的2:1（水凝胶溶液：细胞，v/v）配制水凝胶-细胞混合物，然后将其与细胞培养基按1:1至1:10的比例混合，得到不同粘度的最终的水凝胶细胞悬液。这种培养方法可以很容易地用于实验室规模或大型工业规模的细胞培养放大。研究实验室不需要花哨的生物反应器或昂贵的培养容器。我们将其用于干细胞球体和HEK293 球体的生成。该方法也适用于我们所有的即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。VitroGel 静态悬浮培养产生的细胞可通过离心轻松收集。

水凝胶细胞珠

作为一种可注射的水凝胶系统，VitroGel 具有剪切稀化和快速恢复流变特性。水凝胶溶液可以与细胞混合形成软水凝胶，然后可以将其作为液滴添加到细胞培养基中，形成水凝胶细胞珠。这种培养方法不仅将细胞封装在水凝胶基质中以增强细胞-基质相互作用，而且还允许整个水凝胶-细胞珠悬浮在细胞培养基中以实现最佳培养基渗透。研究人员可以通过改变添加到培养基中的液滴体积来调整水凝胶珠的大小。对于需要牢固附着才能生长的细胞，例如间充质干细胞 (MSC)，这种水凝胶细胞珠培养方法是替代微载体进行 3D 细胞放大的方法。由于优良的介质和氧气渗透性，在水凝胶珠中培养的细胞可以保持长期培养的高细胞活力。该方法适用于我们所有的即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。VitroGel 水凝胶细胞珠培养产生的细胞可以通过 VitroGel 细胞回收溶液收集。

注射载体

VitroGel 是一种出色的动物注射载体。在通过注射器注射等机械剪切力作用下，水凝胶发生凝胶-溶胶转变，成为自由流动状态。然而，一旦剪切力停止，水凝胶的机械强度可以迅速恢复，并发生溶胶-凝胶转变，再次成为水凝胶状态。凭借这种可注射特性，VitroGel 可用于 细胞治疗的体内细胞/药物递送或控释。只需在室温下将水凝胶溶液与细胞/化合物混合，水凝胶即可在 20 分钟内用于注射。除了即用型 VitroGel，研究人员还可以使用 VitroGel 高浓度水凝胶来获得不同水凝胶强度的可注射水凝胶。