dsGreen 是一种非常灵敏的染料，用于检测双链 DNA (dsDNA)。两种染料均用于实时 qPCR 实验中扩增的非特异性检测。

1. 如果 dsGreen 试剂储存温度低于 20 °С，请将其解冻并保存在室温下。为了快速解冻，可将试剂加热至 50 °С。

2. 根据 PCR 试剂制造商的说明计算反应所需试剂的体积。请注意，dsGreen（库存 100х）必须在 PCR 主混合物中稀释至最高 1 倍浓度。

3. 根据 PCR 试剂制造商的说明制备不含 DNA 的 1x 主混合物，添加必要量的 dsGreen。如果您使用不带热启动的 Taq 聚合酶，请将预混液和 PCR 管放在冰上。

4. 将主混合物转移至管或板中并添加 DNA。

5. 根据您的仪器制造商的说明继续进行放大。

笔记：

qPCR 实验中始终包含阳性和阴性对照。 qPCR 扩增的温度程序与给定模板和引物的标准 PCR 程序没有区别。对于检测，应使用 FAM 通道。为了能够区分特定产物和引物二聚体，请在 PCR 程序中使用熔解曲线步骤。