calzyme谷丙转氨酶产品介绍

（L-丙氨酸:2氧代戊二酸氨基转移酶；2.6.1.2谷丙转氨酶（GPT）也称为丙氨酸氨基转移酶。它催化以下反应:GPT L-丙氨酸+α-酮戊二酸-》丙酮酸+L-谷氨酸转氨反应在中间代谢中起重要作用。转氨酶的催化活性需要磷酸吡哆醛作为辅酶。GPT存在于许多动植物组织中，在哺乳动物的心脏和肝脏中活性尤其高。这种酶在哺乳动物组织中以两种不同的同工酶形式存在，线粒体形式和细胞质形式。来自猪心的GPT已被广泛研究。它的分子量为10万。

在pH 7.5和25℃的磷酸钾缓冲液中，催化1微摩尔α-酮戊二酸转化为L-谷氨酸的酶量

由NADH氧化引起的340 nm处吸光度的降低与GPT的催化活性成正比。

组分：

0.1 M磷酸钾缓冲液，pH 7.5。

缓冲液中的1.15M L-丙氨酸（103毫克/毫升）。

缓冲液中的0.31Mα-酮戊二酸（45毫克/毫升）。

蒸馏水中的0.008 M NADH二钠盐（5毫克/毫升）。准备新鲜的。

乳酸脱氢酶（LDH），缓冲液中250 U/ml。化验前立即准备新鲜样品。

酶（GPT）溶液。在缓冲液中制备，使最终浓度为0.1-0.2 U/ml。必须在化验前立即制备新鲜样品。

PROCEDURE

1. 将分光光度计（配有条形记录仪和温度控制装置）设置在340 nm和25°c。

2.向比色皿移液管中加入所示量的以下试剂: 左旋丙氨酸2.60毫升 α-酮戊二酸盐0.10毫升 NADH 0.10毫升 乳酸脱氢酶0.10毫升 混合并在分光光度计中孵育5分钟以达到温度平衡，然后记录340 nm处的空白率。

3.通过向比色皿中加入0.1毫升酶（GPT）溶液来启动反应。

4.记录5-8分钟内340 nm处吸光度的下降率。

5.计算(delta)E340nm纳米/分钟