nvigen：MagVigen™ Easy DNA Select Kit

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MagVigen™ DNA Select 纳米颗粒是 DNA 纯化的理想选择。 MagVigen™ DNA Select 纳米粒子能够有效回收双链和单链 DNA。经过短暂孵育后，MagVigen™ DNA Select 纳米粒子捕获 DNA 产物。生成的纳米颗粒-寡核苷酸复合物可以通过磁铁与样品的其余部分分离。可以使用洗脱缓冲液从纳米颗粒上洗脱保留的基因组材料。

MagVigen™ DNA Select 纳米颗粒能够从检测样品（例如细胞裂解液）中纯化 DNA 产品，使其不含盐和其他污染物。纯化的 DNA 产物可通过凝胶电泳、PCR 定量和测序进行进一步分析。

DNA 选择用于捕获的纳米颗粒。如果 DNA 数量或样品体积增加，则相应放大。

产品内容：

• MagVigen DNA 尺寸选择纳米粒子

• 洗脱液：Tris (PH 8)

所需材料（不含）

• 75%乙醇

• 磁力架，目录号 A20006

所有材料均应储存在 4°C 下。保质期：6个月

DNA捕获

1. 从储存中取出 MagVigen™ DNA Select 纳米颗粒溶液，并将其恢复至室温。




2. 使用前涡旋 MagVigen™ DNA 选择纳米颗粒 10 秒。




3. 对于每20μl 含有不超过 1,000ng DNA 的 DNA 样品，添加40~9 μl 体积的 Easy DNA Select 珠子。

注： MagVigen 纳米粒子的体积比为 (A)2.0:1 至 (B)0.7:1：DNA 样品可用于分离 ≥ (A)100bp 至 (B)400 bp 的 DNA，可以测试不同的比例以达到所需的 DNA 大小选择。

4. 涡旋或移液器吸取反应溶液以充分混合

注意： 捕获反应期间最好不要引入气泡。

5. 将 MagVigen™ DNA Select 纳米颗粒-DNA 反应在室温下孵育5~15 分钟。




6. 孵育后，使用磁铁将 DNA 捕获的纳米颗粒从溶液中分离出来。




7. 用移液器小心地除去上清液，注意不要扰动捕获 DNA 的纳米颗粒沉淀。




8. 将磁铁保持在适当的位置，通过添加 100μl 新鲜制备的 75% 乙醇来清洗 DNA 捕获的纳米颗粒沉淀。静置 3 分钟。

注意： 根据需要调整乙醇的体积，以充分覆盖 DNA 捕获的纳米颗粒颗粒。

9. 取出并丢弃乙醇溶液。




10. 重复步骤8~9，总共进行两次洗涤。




11. 将珠子风干 2~10 分钟。




12. 添加 20μl 洗脱缓冲液，从纳米颗粒中洗脱捕获的 DNA。

注： 洗脱缓冲液的体积可根据需要调整。

13. 轻轻吹打混匀，室温孵育 5 分钟。

注意：洗脱反应过程中最好不要引入气泡。

14. 用磁铁将纳米颗粒与洗脱的 DNA 分离。




15. 将含有 DNA 产物的上清液转移至干净的管中。纯化的 DNA 可用于下游应用。

    DNA 大小切割	100bp	200bp	300bp	400bp	500bp
    比率	>1.8~2.2	1.0~1.6	0.8~0.9	0.7	0.6或<0.6

    表 1. MagVigen™ 溶液与 DNA 样品溶液的比例的一般指导，以实现所需的 DNA 大小截断（100 bp~500 bp）。人们可以滴定不同的比例来确定最佳条件。

    

图 1显示了通过调整珠子体积与 DNA 样品体积的比率得到的大小结果。使用 Themo Scientific GeneRuler 100 bp DNAladder 和 2% 琼脂糖凝胶。

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