β氨基己糖苷酶活性测定试剂盒

β氨基己糖苷酶活性测定试剂盒

• 活性分析(AcA)，免疫分析(IA)
• 样本类型
• 血浆，血清
• 特征

• β氨基己糖苷酶活性测定试剂盒是一种简单的荧光测定法，在96孔微量滴定板中测量β氨基己糖苷酶活性。每个试剂盒提供足够的试剂进行多达100项分析，包括空白、β氨基己糖苷酶阳性质控品和未知样品。

成分

1. 重组β氨基己糖苷酶:一瓶25 μL的50 μg/mL重组人β氨基己糖苷酶。
2. 10X底物:一个500 μL样品瓶。
3. 5X检测缓冲液:一个30毫升的瓶子。
4. 10X中和缓冲液:一个30毫升的瓶子2个

• 1X检测缓冲液:用去离子水以1:5的比例稀释储备5X检测缓冲液，制成1X溶液。搅拌或涡旋至均匀。在室温下储存未使用的1X检测缓冲液。
• 1X底物:用1X检测缓冲液以1:10的比例稀释10X底物。例如，为每个使用的孔添加5μL 10X底物到45μL 1X检测缓冲液中。注意:只准备足够立即使用的1X基底。

• 1X中和缓冲液:用去离子水将储备的10X中和缓冲液以1:10稀释成1X溶液。搅拌或涡旋至均匀。在室温下储存未使用的1X中和缓冲液。







化验程序

1. 向96孔微量滴定板中加入50μLβ氨基己糖苷酶样品。
2. 向每个孔中添加50μL 1X底物。
3. 避光37°C孵育15分钟。
4. 向每个孔中添加100μL 1X中和缓冲液。

5. 使用微孔板荧光计在365 nm的激发波长和450 nm的发射波长下读取板。

• 储存；储备
• -80摄氏度
• 存储注释
• 收到后，将重组β氨基己糖苷酶和10X底物储存在-80°c下。将剩余成分储存在室温下。

仅供研究使用

• 背景
• 己糖胺酶是一种从N-乙酰基-β-D-己糖胺中水解末端N-乙酰基-D-己糖胺残基的酶。这种酶定位于细胞溶酶体，是由α或α亚单位形成的二聚体，产生三种可能的二聚体组合。α组合(同工酶A)是具有已知功能的组合:在体内水解GM2神经节苷脂。αα(同工酶B)和α(同工酶S)的另外两种组合已在细胞组织中观察到，但它们的功能未知。同工酶A与辅因子GM2激活蛋白联合作用，降解GM2神经节苷脂和其他具有末端N-乙酰氨基己糖的分子。编码亚单位的基因突变会导致山德霍夫症。α亚单位位点的突变减少了GM2神经节苷脂的水解，这是泰-萨克斯病的主要原因。虽然溶酶体己糖胺酶的α和α亚基都可以切割GalNAc残基，但只有α亚基能够水解GM2神经节苷脂，因为α亚基中有一个关键残基Arg-424和一个由氨基酸序列形成的环结构。GM2激活蛋白作为转运蛋白将GM2神经节苷脂定位于己糖胺酶，因此功能性己糖胺酶能够将GM2神经节苷脂水解为GM3神经节苷脂。

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