MyQuVigen™ – Streptavidin, emi 635 nm

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MyQuVigen纳米颗粒是超顺磁性氧化铁和量子点的组合。它们提供了高磁矩和明亮稳定的荧光，非常适合广泛的、多重荧光成像的可控磁操作。MyQuVigen链霉亲和素荧光磁性纳米颗粒(emi 635 nm)可以普遍结合生物素缀合的抗体。它们的最大荧光发射位于635 nm。激发波长可以是488纳米或更短。MyQuVigen链霉亲和素荧光磁性纳米颗粒或下游复合物易于使用磁性架(目录号A20006)进行分离。

MyQuVigen链霉亲和素荧光磁性纳米颗粒(emi 635 nm)与小鼠抗体一起理想地用于从组织或器官获得的细胞群体混合物中分离或标记细胞(例如CTC、干细胞)。分离的细胞用强荧光标记，并可直接用于显微镜成像或其他基于荧光的细胞分析。分离的细胞也是活的，可以进一步培养或用于下游分子分析，如mRNA分离和RT-PCR。使用MyQuVigen纳米颗粒进行细胞分离无需使用色谱柱，因此细胞不会因通过色谱柱基质而受到机械应力的影响。磁性分离的细胞高度纯化，并保持其活力，是下游应用的理想选择。

链霉亲和素荧光磁性纳米颗粒用于细胞选择/标记的优势

• 简单快速地制备纳米颗粒-初级小鼠抗体缀合物
• 简单温和的细胞分离
• 强而持久的荧光信号
• 一致的高质量结果
• 高结合能力
• 高生物相容性
• 低非特异性结合

产品内容

• MyQuVigen链霉亲和素荧光磁性纳米颗粒(emi 635 nm)(目录号41005)在pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水(PBS)中提供。每瓶含1毫升溶液，粒子浓度为1毫克/毫升，足以结合2000万个细胞。

容量:5克生物素化抗体/毫升磁珠

纳米粒子尺寸:使用动态光散射测量的200-500纳米。

多分散指数 < 0.2.

除磁铁外的所有材料都应储存在4°c下。

保质期:6个月

草案

该协议提供了浓缩10的一般指南5使用MyQuVigen链霉亲和素荧光磁性纳米颗粒(emi 635 nm)的细胞。请根据具体应用调整试剂的量。

1. 使用前，轻轻涡旋或吸取小瓶中的MyQuVigen链霉亲和素荧光磁性纳米颗粒(emi 635 nm)。




2. 等份50 μl纳米粒子溶液用于富集实验。

注意: 50 μl通常足以富集1-10×105细胞。细胞捕获效率可受多种因素影响，例如细胞群体中靶细胞的频率、细胞表面表达的抗原/表位的密度以及抗体亲和力。相应地调整纳米颗粒的量。

3. 用500 μl洗涤缓冲液洗涤纳米颗粒两次。将磁铁放在试管侧面1-2分钟，将纳米颗粒从溶液中分离出来，并小心去除上清液(磁铁仍在侧面)。




4. 向纳米颗粒中加入500 ng生物素偶联的抗体(体积为100-200 μl ),并在旋转器上孵育30-60分钟。

注意: 50 μl纳米颗粒可以结合约200 ng的抗体。

5. 用500 μl洗涤缓冲液洗涤纳米颗粒-抗体缀合物两次，以去除未结合的抗体。




6. 将纳米颗粒-抗体缀合物重新悬浮于洗涤缓冲液(50 μl)中，并将其添加至细胞样品，总体积为0.1-0.5 ml。




7. 在室温下，将纳米颗粒与细胞样品在轨道振荡器上孵育30分钟。




8. 孵育后，使用磁铁将纳米颗粒(与细胞结合)从溶液中分离出来，并小心去除上清液。




9. 用500 μl细胞培养基洗涤纳米颗粒-细胞复合物两次。




10. 分离的细胞可以重新悬浮在细胞培养基中用于下游应用。

注意:生物素偶联抗体也可以直接加入到细胞悬液中，然后应用纳米颗粒进行细胞捕获。

图一。使用生物素-抗人EpCAM抗体和MyQuVigen-链霉亲和素纳米颗粒通过MyQuVigen-抗EpCAM抗体捕获的人类细胞的代表性图像。

MyQuVigen™ – Streptavidin, emi 635 nm