anogen：多重人细胞因子ELISA试剂盒(Th1/Th2/Th17)

anogen：多重人细胞因子ELISA试剂盒(Th1/Th2/Th17) 货号：EM10003

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多重人类细胞因子ELISA试剂盒(Th1/Th2/Th17细胞因子)，96孔

用于同时定量测定细胞培养上清液和其他生物样品中的T辅助细胞分化细胞因子，包括干扰素-γ、白细胞介素-2、白细胞介素-4、白细胞介素-10、白细胞介素-13、白细胞介素-17、白细胞介素-22和肿瘤坏死因子-α

这种用于Th1/Th2/Th17细胞因子的多重ELISA试剂盒被设计用于半定量和同时测定与T辅助细胞分化相关的细胞因子。该试剂盒同时测定细胞培养上清液和其他生物样品中的干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-13(IL-13)、白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-22(IL-22)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)。Th1/Th2/Th17细胞因子多重ELISA试剂盒与其他抗原定量细胞因子ELISA试剂盒结合，有望用于研究各种疾病模型中细胞因子表达、T辅助细胞分化之间的关系。   该试剂盒仅供实验室研究使用，不应用于任何诊断或治疗程序。 

介绍 

T辅助细胞(Th细胞)是一组多样化的CD4+ T细胞，通过细胞因子分泌和细胞间接触(表面分子表达)在免疫应答中发挥重要作用。Th细胞的重要性表现在HIV患者的获得性免疫缺陷，其CD4+ T细胞被HIV病毒选择性感染和破坏。Th细胞的功能是多方面的，包括刺激CD8+细胞毒性细胞，促进B细胞增殖，调节抗体亚类转换，激活巨噬细胞和先天免疫系统中的其他细胞。 

T辅助细胞来源于幼稚CD4+ T细胞，其在骨髓中产生，并在与T细胞受体上的互补决定区相匹配的同源抗原接触时，在外周淋巴器官和血液中分化为效应Th细胞。在20世纪80年代中期，Th细胞根据其细胞因子分泌模式及其在细胞免疫和体液免疫中的作用被分为辅助性T细胞1(Th1)和辅助性T细胞2(Th2)。Th1细胞分泌IFN-γ作为其标志性细胞因子，也是IL-2的主要产生者。Th2细胞不能产生IFN-γ，但产生IL-4、IL-5和IL-13作为其标志性细胞因子。Th1细胞是宿主防御细胞内细菌和病毒所必需的，而Th2细胞是针对细胞外寄生虫的体液反应所必需的。细胞因子在T辅助细胞谱系的发育和维持中起重要作用。在IL-12存在的情况下，幼稚的CD4+细胞倾向于分化为Th1，而IL-4刺激Th2的发展。有趣的是，一个Th亚群产生的细胞因子倾向于抑制其他Th亚群的发展。例如，Th2分泌的IL-10可以通过抑制Th1和刺激Th2分化来抵消IL-12的作用。 

在2005年，Harrington等人描述了分泌IL-17的CD4+ T细胞的新亚群作为辅助性T细胞17 (Th17 ),其参与自身免疫和清除细胞外细菌和真菌。据观察，在缺乏IFN-r和IL-4的情况下，IL-23可以从幼稚的CD4+ T细胞诱导Th17细胞。最近，提出了T滤泡辅助细胞(Tfh)、调节性T细胞(Treg)、T辅助细胞9(Th9)和T辅助细胞22(Th12)。 

IL-2是驱动适应性免疫的关键细胞因子之一。在T细胞受体通过与抗原呈递细胞在MHC上呈递的抗原结合而被激活后，由幼稚CD4+细胞立即分泌。IL-2刺激Th1分化、克隆扩增并作为自分泌刺激其自身产生。它还促进抗原特异性记忆T细胞的存活，并刺激调节性T细胞的成熟。细胞因子也影响B细胞、CD8+ T细胞、γδT细胞、NK细胞和LAK细胞的活性。

 IL-10由多种细胞类型表达，并在炎症和免疫反应中起重要作用。它下调Th1细胞因子的表达。IL-10还抑制单核细胞和中性粒细胞产生促炎细胞因子，下调单核细胞和树突细胞上活化和共刺激分子的表达，并刺激B细胞和肥大细胞的生长。

由Th1，CD8产生+T细胞和自然杀伤(NK)细胞，已知IFN-g刺激幼稚CD4+ T细胞分化为Th1细胞。它既是病毒复制的抑制剂，也是许多免疫功能的调节剂。据报道，IFN-g诱导其自身的表达。IFN-g具有抗病毒、抗原虫和免疫调节活性。IFN-g的免疫调节作用是广泛而多样的。在单核细胞/巨噬细胞中，IFN-g增加1类MHC抗原的表达；增加IL-1、血小板活化因子、H2O2和蝶呤，保护单核细胞免受LAK细胞介导的裂解；并下调IL-8 mRNA的表达。IFN-g选择性增强IgG2aLPS刺激的B细胞活化分泌。 IFN-g已被证明能上调内皮细胞上ICAM-1的表达，但不能上调E-选择素或VCAM-1的表达。据报道，IFN-g还与胚胎间隔神经元胆碱能表型的形成有关。

 IL-4最初被定性为B细胞刺激因子(BSF-1 ),因为它在Th2细胞分化、B细胞扩增和分化为浆细胞中起关键作用。后来发现IL-4是一种多效性细胞因子，对不同类型的细胞具有多种免疫反应调节功能。IL-4诱导抗体类别转换为IgE，上调II类产生，并在气道过敏中起作用。IL-4刺激针对寄生虫的保护性免疫。还报道了IL-4与转移有关。IL- 4是由幼稚的CD4产生的+t细胞，Th2细胞，胎儿胸腺细胞，CD8+t细胞、肥大细胞和嗜碱性粒细胞。IL- 4与IL-13具有大约25%的氨基酸序列同源性，IL-13与IL-4具有许多相同的生物学功能。由四个外显子和三个内含子组成的人IL-4基因已经被定位在一条染色体上，该染色体含有串联排列的IL-3、IL-5、IL-9、IL-13和GM-CSF基因。 

IL-13主要由活化的辅助性T细胞分泌。除了IL-13Rα1和IL-13Rα2之外，IL-13还与IL-4Rα结合。IL-13的功能与IL-4部分重叠。IL-4和IL-13都通过受体激活与信号转导子和转录激活子6 (STAT6)连接。IL-13可以诱导B细胞增殖和IgE分类转换。然而，与IL-4相比，IL-13在这方面的能力较弱。与IL-4不同，IL-13在造血细胞转移中不发挥重要作用，如T辅助细胞向T辅助细胞2的分化。IL-13还与过敏性气道疾病的许多特征相关，包括粘液分泌过多、杯状化生、趋化因子诱导和效应细胞募集。所有这些都会导致气道阻塞。已发现IL-13基因多态性与嗜酸性粒细胞计数、血清总IgE和哮喘高风险有关。据报道，IL-I3信号传导在诱导寄生器官中非免疫细胞的生理变化中是重要的。

 IL-17A是新发现的促炎细胞因子家族的原型，该家族由IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E (IL-25)和IL-17F组成。所有的IL-17都具有相似的结构，具有四个高度保守的半胱氨酸残基和相同的三维结构，这使该家族区别于其他细胞因子。IL-17由一组称为Th17细胞的CD4+ T辅助细胞产生。除了先前发现的Th1和Th2细胞，Th17细胞存在于第三组辅助性T细胞中。IL-23，一种生长和稳定因子，是第一个被发现参与Th 17细胞发育的细胞因子。后来，其他细胞因子，包括TGF-β，白细胞介素-6和白细胞介素-21，也被发现有助于这一过程。该过程中涉及的转录因子被鉴定为STAT3、RORgt和RORa。像IFN-g一样，IL-17是延迟型反应的有效介质。IL-17诱导许多其他促炎细胞因子和趋化因子的分泌，如IL-6、IL-8、GM-CSF、G-CSF、TGF-β、TNF-α、GRO-α、MCP-1，并刺激NF-kappaB、丝裂原活化蛋白激酶和许多细胞类型的前列腺素的表达。通过刺激细胞因子的产生和募集单核细胞嗜中性粒细胞到炎症部位，细胞因子在对组织损伤和侵袭的反应中发挥其作用。 IL-22由树突状细胞、T细胞和自然杀伤细胞在细菌感染、自身免疫和组织炎症过程中产生。

IL-22通过其专门在先天免疫细胞上表达的受体作用于这些细胞。在CD4+ T辅助细胞中，已发现IL-22表达与Th17和Th1相关。最近，通过共表达趋化因子受体CCR6和皮肤归巢受体CCR4和CCR10，表征了表达IL-22的T辅助细胞亚群(Th22 ),其与其他T细胞不同。银屑病皮肤炎症、特应性皮炎和炎症性肠病中IL-22表达升高。在皮肤T细胞淋巴瘤中，IL-22主导肿瘤微环境，并且观察到STAT3磷酸化。还发现IL-22在小鼠溃疡性结肠炎模型中促进小鼠肝细胞存活并改善肠道炎症。发现IL-22的天然拮抗剂IL-22结合蛋白下调IL-22的功能。 

肿瘤坏死因子α(TNF-α)，也称为恶病质素，最初因其引起小鼠肿瘤出血性坏死的显著能力而命名。TNF-α的主要来源被认为是单核细胞/巨噬细胞，但已知各种细胞类型表达这种细胞因子。TNF-α在细胞因子如IL-1、1L-2、GM-CSF、TNF-α本身和细菌脂多糖的刺激下产生。Th1细胞分泌IFN-g、IL-2、IL-10和TNF-α/β。各种病理状况与TNF-a的高水平产生有关，包括脓毒性休克综合征、恶病质、自身免疫性疾病、肝炎、白血病、心肌缺血、多发性硬化、类风湿性关节炎和脑膜炎球菌败血症。TNF-a是一种多效性细胞因子，可通过TNF-a毒性(组织损伤、分解代谢疾病和介导脓毒性休克)诱发疾病，并改善宿主防御机制(刺激炎症和增加免疫细胞功能)。由于TNF-α在免疫反应中具有如此复杂和重要的功能，研究TNF-α有助于理解其在T细胞分化中的作用。

 这种ELISA测定是一种3.5小时的固相免疫测定，可容易地应用于测量细胞培养上清液和其它生物液体中与T辅助细胞分化相关的八种细胞因子的水平。它与其他蛋白质无交叉反应。

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