品牌 | 其他品牌 | 货号 | PCR-420 |
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供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药 |
jenabioscience:Taq聚合酶
不含缓冲液的热稳定DNA聚合酶
水生栖热菌,重组,大肠杆菌
Jena Bioscience由Max-Planck-Institute of Molecular Physiology(Dortmund)的一组科学家于1998年成立,利用超过25年的学术知识为100多个国家的研究和行业客户开发创新试剂。
供一般实验室使用。
单位定义:一个单位被定义为使用hering精子DNA作为底物,在70℃下30分钟内催化10纳摩尔dNTP结合成酸不溶性形式所需的酶量。
运输:凝胶包装运输
储存条件:储存在-20°C
避免冷冻/解冻循环
保质期:12个月
表单:液体
浓度:5单位/微升
描述:
该聚合酶被推荐用于常规PCR应用(最大4 kb片段长度)或高通量PCR。
这种酶在72℃复制DNA,在镁存在的情况下催化核苷酸聚合成5’→3’方向的双链DNA。它还具有5’→3’聚合依赖性核酸外切酶替换活性,但缺乏3’→5’核酸外切酶(校对)活性。
内容:
不包括反应缓冲液和核苷酸。请参考我们的缓冲液&成分和核苷酸部分。
Taq聚合酶
20 mM Tris-HCl、100 mM KCl、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、稳定剂、50 % (v/v)甘油、pH 8.0(25℃)中的5单位/μl Taq DNA聚合酶
检测设置:
开始前,融化所有成分并*底涡旋以确保均匀性。
成分 | 最终检测浓度。 |
PCR级水 | 填充至最终数量 |
反应缓冲液 | 1个 |
dNTP混合 | 200微米 |
Taq聚合酶 | 0.025-0.05单位/微升 |
每种底漆的底漆混合物 | 每种引物200-400纳米 |
模板/样本DNA | < 10 ng DNA/assay |
循环条件:
快速旋转试管/平板以去除气泡,并将其放入循环仪中。
最初的 变性 | 95摄氏度 | 2分钟 | 1个 |
变性 热处理1) 延长2) | 95摄氏度 50-68摄氏度 72摄氏度 | 10-20秒 10-20秒 20秒- 4分钟 | 25-30倍 |
1)退火温度取决于所用引物的熔化温度。
2)延伸时间取决于待扩增片段的长度。建议时间为1分钟/kb。
推荐的缓冲系统:
红宝石缓冲液(#PCR-272)包括密度试剂+追踪染料,并允许将PCR产物直接装载到电泳凝胶中。对于DNA检测/荧光DNA染色,我们建议使用新一代染料(例如SYBR DNA Stain,#PCR-273)代替经典但高度诱变的溴化乙锭。,
晶体缓冲液(#PCR-271)推荐用于下游应用,如DNA测序、连接、限制性消化或需要通过吸光度或荧光激发分析PCR产物的情况。对于凝胶电泳,在将PCR加载到凝胶中之前,添加凝胶加载缓冲液和荧光DNA染色剂(例如,带有DNA染色剂的凝胶加载缓冲液,#PCR-274 - #PCR-276)。使用预染色凝胶或运行后染色方案也是可能的。,
KCl缓冲液(#PCR-262)推荐用于常规PCR反应。缓冲液针对最高特异性进行了优化,但可能需要对检测参数(如MgCl)进行额外微调2浓度和退火温度。,
标记缓冲液(#PCR-263)推荐用于DNA标记或诱变应用。缓冲液是专门为将标记或修饰的核苷酸掺入DNA而优化的。对于大多数引物-模板对,它在广泛的反应条件下给出了优异的结果,但是扩增也可能倾向于增加不准确性。
MgCl的优化2浓度:
MgCl2溶液- 25毫米(#PCR-266)建议用于优化最终的Mg2+专注。最佳功能需要1.5-2.0 mM的浓度。较低的浓度产生较高的特异性,而较高的浓度产生较高的产量。
相关产品:
dNTP Mix - 10 mM, #NU-1023
Ruby Buffer, #PCR-272
Crystal Buffer, #PCR-271
KCl Buffer, #PCR-262
MgCl2 Solution - 25 mM, #PCR-266"
上海牧荣生物科技有限公司
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