什么是 PicoGreen™ 定量？

PicoGreen dsDNA 定量试剂是一种高灵敏度荧光核酸染色剂，用于定量双链 DNA。PicoGreen 广泛用于分子生物学程序，例如用于亚克隆的 DNA 片段纯化、用于文库生成的 cDNA 合成以及引物测定。

PicoGreen 定量的优点

广泛使用的核酸浓度测量方法是测定 260nm 处的吸光度 (A260)。这被称为吸光度方法，由于测量速度快、不需要试剂盒或试剂的直接定量以及现代微量仪器的宽动态范围而被广泛使用。 荧光方法通常用于由于单链核酸、蛋白质和核苷酸的污染而需要进行特定定量的情况，这些单链核酸、蛋白质和核苷酸可能会影响使用吸光度的总信号。此外，核酸制剂中经常存在的污染物可能会造成干扰，并且无法区分 DNA 和 RNA。

Hoechst（双苯甲亚胺）染料也是敏感的核酸染色剂。然而，该测定的选择性稍高，无法用于 dsDNA，并且在蛋白质存在时不会显示出显着的荧光增强。

PicoGreen dsDNA 定量分析可选择性检测低至 25 pg/ml 的 dsDNA，其中存在的 ssDNA、RNA 和游离核苷酸对荧光强度的影响极小。该检测呈线性跨越三个数量级，并且具有少量的序列依赖性，这意味着可以从一系列来源（例如基因组 DNA、病毒 DNA、小量制备 DNA 或 PCR 扩增产物）精确测量 DNA。

PicoGreen dsDNA 定量非常适合基于 PCR 的测定、DNA 损伤测定、基因组 DNA 定量、微阵列样品、测量复杂混合物中的 dsDNA 以及病毒 DNA 定量。

用于 PicoGreen 定量的 QFX 荧光计

QFX 荧光计是同类仪器中灵敏、重现性好的仪器。对于需要增强特异性或灵敏度的荧光测定应用来说，它是一种强大的解决方案。该仪器能够使用四个用户可选的荧光通道来定量核酸和蛋白质，从而允许使用所有主要的定量测定。QFX 荧光计提供的数据质量以及强大的软件和网络集成，可实现无缝数据处理。屡获殊荣的 DS-11 系列分光光度计/荧光计还集成了完整的荧光功能。

当 QFX 与 DeNovix 的荧光检测结合使用时，它可以定量 0.5 pg/μL 至 4000 ng/μL 范围内的 DNA，是定量降解、污染或低浓度样品的最佳解决方案。

DeNovix 荧光计的主要优点之一是科学家可以选择使用任何制造商的检测方法，包括 PicoGreen dsDNA 或 QuantIT™ 检测方法。