badrilla免疫测定校准技术简述

Badrilla 开发了一种用于免疫测定校准的专有技术，可将常见的免疫测定平台（蛋白质印迹）升级为强大的定量平台。定量免疫测定可用于有限数量的应用（某些 ELISA 测定），但大多数免疫测定形式（蛋白质印迹、免疫显微镜）中不存在定量免疫测定。研究人员希望尽可能以绝对化学单位准确、可重复地测量生物标志物。为了实现这一目标，Badrila 创建了一种专有的校准标准技术，将蛋白质印迹升级为定量免疫测定，能够检测绝对化学单位（pmol/样本或类似单位）的生物标志物浓度。这为快速开发感兴趣的生物标志物的简单定量测定提供了一条途径。

这项技术是如何运作的？

高质量校准标准品将特定免疫测定的表位特征整合到重组产品中，或者通过共价连接到支架上确定的反应位点（本身是重组蛋白：b），或者通过制造为支架本身的延伸a）。这些制造方法允许根据需要掺入各种复杂的表位，从简单的肽和磷酸肽到蛋白质结构域。

可以快速生成所研究的生物标志物校准标准。此类校准标准可以以允许构建校准曲线的浓度范围并入测定中。这可用于高精度地确定生物标志物的绝对浓度。

在测试系统中，对 His6 表位校准标准品进行了两次蛋白质印迹分析。观察到 55kDa 的单条带，信号强度随校准物上样量的变化而变化 (4pmol – 0.125pmol)。

原始数据的密度测定允许构建校准曲线，该校准曲线可以通过以高的精度一式三份检查的三种校准物浓度轻松定义。使用校准曲线可以计算并行检查的生物标志物的浓度。观察到的浓度和绝对浓度的变化小于 10%。

哪些生物标志物可以校准？

· 线性肽表位

· 翻译后修饰位点（磷酸化、糖化等）

· 半抗原（染料、药物、代谢物）

· 蛋白质结构域

· 单个或多个表位，以及

· 上述的组合

通过协作发展

Badrilla 与利兹大学、利物浦大学和牛津大学的杰出学术团体合作开展了一项研发计划。我们富有成效的协作方法使我们能够：

· 采用定量质谱法的基准定量蛋白质印迹技术

· 将定量蛋白质印迹与高通量蛋白质印迹相结合，以实现更高的分析通量

· 探索新颖的制造技术（用于校准标准）以扩展该技术的多功能性。