jenabioscience:病毒RNA+DNA制备试剂盒-柱试剂盒Viral RNA+DNA Preparation Kit - Column Kit ——从血液、血清、组织、细胞培养物或拭子中基于旋转柱的RNA+DNA纯化

Jena Bioscience由Max-Planck-Institute of Molecular Physiology(Dortmund)的一组科学家于1998年成立，利用超过25年的学术知识为100多个国家的研究和行业客户开发创新试剂。

供一般实验室使用。

运输:在环境温度下装运

储存条件:在环境温度下储存

保质期:12个月

描述:
病毒RNA+DNA制备试剂盒设计用于从各种病原体生物(如病毒或细菌)中快速有效地分离RNA和DNA。样品可以是新鲜的或冷冻的血浆/血液(用除肝素以外的抗凝血剂处理)、血清、其他无细胞体液或病原体感染的组织。该试剂盒允许从鼻腔或咽喉拭子中高产量分离病毒RNA/DNA。
该试剂盒专门设计用于使用低洗脱体积分离高质量核酸，并允许灵敏的下游分析，包括定量PCR和RT-PCR。纯化的RNA/DNA不含蛋白质和核酸酶。病毒RNA+DNA制备试剂盒使用包含离液盐的裂解缓冲液来灭活RNA酶/DNA酶，并使用优良的硅胶膜技术来快速纯化完整的RNA/DNA。制备程序经过优化，可在30分钟内获得可靠的结果。

内容:

所需的附加材料:
96-99 %乙醇
1.5毫升试管

准备程序:
DNA纯化遵循细胞裂解、RNA/DNA结合、洗涤和洗脱程序。开始前，按照数据表和瓶子上的指示，向清洗缓冲液A和B中添加乙醇(96-99 %，不包括在试剂盒中)。请注意，洗涤缓冲液的乙醇浓度在长期储存过程中可能会降低，导致最终DNA产量下降。
所提供的裂解缓冲液包含载体分子以增强RNA/DNA在柱膜上的结合。

1a从鼻腔或咽喉拭子制备

• 转移250微升

  裂解缓冲液

  放进微量离心管。
• 切下带有收集的鼻或喉细胞的棉尖，并将其置于微量管中。
• 关闭试管并涡旋15秒。
• 在室温(20-25°C)下孵育10分钟。
• 取下棉签，在试管边缘将其挤出。
• 添加250微升

  乙醇(96-99 %)

  并通过轻轻涡旋充分混合。

1b从血浆、血清、尿液、细胞培养上清液、无细胞液体或病毒感染组织中制备

• 将100 μl血浆、血清、尿液、细胞培养上清液、无细胞液体或病毒感染组织转移到1.5 ml微管中。
• 注意:较大体积(高达200 μl)的样品可以很容易地放大，但可能需要更大的试管用于裂解程序。
• 添加250微升(或2.5倍样品体积)的

  裂解缓冲液.

• 涡旋15秒。
• 在室温(20-25°C)下孵育10分钟。
• 添加250微升(或2.5倍的样品体积)

  乙醇(96-99 %)

  并通过轻轻涡旋充分混合。

2列装载

• 放置a

  旋转柱

  放入提供的2 ml收集管中。
• 旋转溶解产物-乙醇混合物，并将溶液转移到

  旋转柱.

• 盖上盖子，离心

  旋转柱

  转速为13，000转/分钟，持续1分钟。
• 丢弃收集管中的流通液，并将色谱柱放回同一管中。
• 注意:色谱柱储器的最大容量为800 μl。对于更大的样品容量，丢弃中间的流通液并再次装载旋转色谱柱。

3柱清洗

• 添加500微升

  洗涤缓冲液A(加入乙醇)

  到

  旋转柱

  并在13,000 rpm下离心1分钟。
• 丢弃收集管中的流通液，并将旋转柱放回同一管中。
• 添加500微升

  洗涤缓冲液B(添加乙醇)

  并以13，000 rpm离心1分钟。
• 注意:在第一次使用清洗缓冲液B之前，按照瓶子上的指示添加乙醇。
• 丢弃收集管中的流通液，并将旋转柱放回同一管中。
• 以13，000 rpm的速度离心1分钟。
• 注意:干燥膜很重要，因为残留的乙醇可能会干扰下游反应。

4洗脱

• 放置

  旋转柱

  放入新的1.5毫升微量试管(未提供)。
• 添加40-50微升

  洗脱缓冲液

  直接到旋转柱的膜上。
• 注意:避免用移液管头端接触薄膜。
• 室温下孵育1分钟。
• 以13，000 rpm的速度离心1分钟。
• 使用2-5 μl洗脱的RNA和/或DNA作为PCR或RT-PCR检测或进一步下游应用的模板。洗脱的RNA/DNA可以储存在-70℃下

上海牧荣生物科技有限公司

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